（一）生物安全实验室三级（BSL-3）适用于人间高致病性禽流感的相关研究。

（二）进入BSL-3 实验室操作高致病性禽流感病毒的实验室工作人员要经过特殊培训，并且在专家的指导下工作。

（三）BSL-3 实验室操作准则：

1．实验器材应避免使用玻璃制品和锐器。进入BSL-3实验室前，实验人员应备足实验所需的各种器材、试剂、消毒剂和实验动物。物品进入物流通道前应再次核对品种数量，一次带入，尽量避免中途增加、补充。

实验中发现不得不增补器材用品时，人员和物品的进入严格执行人、物分开定向流通，严禁交叉。

2．所有的实验、检测操作都必须在指定区域内进行：

（1）涉及感染性物质的操作必须在生物安全柜内进行，生物安全柜使用前后均应用紫外灯照射30分钟。

（2）动物接种、采血应当在负压动物饲养箱内进行。

（3）解剖动物必须先在负压饲养箱内将动物处死，取样后的尸体包裹在浸透消毒液的纱布（纸巾）中，放在密闭容器内或严密包装，容器或包装外表面消毒剂消毒后，转移至生物安全柜，在浸消毒剂的纱布或纸巾上操作。

（4）处死动物必须在负压饲养箱内进行，然后浸泡在消毒剂内并密闭包装，包装的外表面喷洒消毒剂后送压力蒸汽灭菌间，待压力蒸汽灭菌处理。

3．菌毒种的使用严格执行菌毒种有关管理规定，责任人签订责任书，做到双人双锁保管。

4．实验中不得不使用玻璃制品和锐器时，应通过镊子等工具夹取，尽量避免直接用手接触。操作液体材料时，要使用吸液球或机械移样器吸取液体，且动作应准确、轻柔，避免产生气溶胶或滴溅。

5．必须使用螺口可密闭的离心管或试管进行离心。操作时应先在生物安全柜内装入待离心的液体，平衡后拧紧离心管螺盖，用酒精棉球擦拭离心管外部，进行表面消毒后，放置离心机内离心或用仪器设备进行操作。离心及使用仪器设备都必须及时如实地填写使用登记。

6．实验动物放在负压饲养箱内饲养，每天至少观察1—2次，做好观察记录。每隔两天更换一次垫料，换下的垫料应使用化学消毒剂浸泡，然后送灭菌室进行压力蒸汽灭菌处理。观察和更换垫料操作前应在乳胶手套外加戴线手套，操作时要注意防止被动物抓咬。所有实验动物操作应在生物安全柜中进行。

7．完成每一项试验（感染性材料的操作、动物解剖）或转换实验区时都应更换第二层手套，摘下的手套应立即置于盛有消毒剂的容器中。

从BSL-3实验室进入ABSL-3实验室，及从ABSL-3实验室返回BSL-3实验室时都必须经过第二更衣室通道，按规定程序更换隔离服和第二层防护服。

8．实验遗弃的生物标本、培养液和接触感染性物质的培养瓶、乳钵、试管、吸头、吸管等器材应分别收集在盛有消毒剂的容器内；动物解剖器材、针头等利器应置于盛有消毒剂的耐扎容器内；其他废弃物应收集在专用垃圾袋中。待试验完毕，将上述垃圾袋及容器密闭，并进行外表消毒，集中于带盖的污物桶内，送至压力蒸汽灭菌室指定位置，待压力蒸汽灭菌。

9．每次实验、检测工作结束后，工作人员应对涉及的所有工作区域、仪器设备和试验台面进行清洁整理和消毒处置。

（四）BSL-3 实验室设施

1．实验室有特殊的要求，要在建筑物中自成隔离区或为独立建筑物，在入口处要贴有生物危害标识。

2．BSL-3使用前必需BSL-3认证委员会的认证通过，才能使用，只有实验室主任才能决定以上生物安全三级实验室的变更实施。

3．实验室内要有使工作能够安全进行充足的空间，容纳随时要用的一些物品，内部设计易于清理，不能铺设地毯，实验室工作区之外有长期的存贮间。

4．从实验室走廊进入实验室时，要配备一系列自动关闭、可上锁的双门，所有窗户关闭、密封，出口处有明确辨认的标识，禁止与工作无关的物品放入实验室。

5．实验室由清洁区（包括登记处、BSL-3控制室及第一更衣室）、半污染区（包括准备间、第二更衣室及相应的缓冲间，及物品紫外线照射消毒区）和污染区（包括BSL-3生物安全柜，离心机、动物饲养室、动物解剖室等），污染区和半污染区间设缓冲间、传递窗，传递窗内设物理消毒装置，半污染设紧急撤离使用的安全门。

6．实验室的内墙壁、地板、天花板在设计上应便于净化，密封表面存在缺口，墙壁、天花板、地板光滑、防水、抗化学试剂侵蚀，能抵抗实验室常用的消毒剂，地板一体、抗滑，室内的穿孔要密封。

7．工作台的顶部应防水、耐适当的热及有机物侵蚀，耐酸、碱及净化工作台表面和设备的消毒剂。

8．实验室家具可承受预期负荷，在工作台、柜子及设备之间的空间应能清洁，实验室工作区域的桌子及其它家具使用一种非纺织品材料覆盖，易于清洗。

9．实验室要配置生物安全柜，要以下列方式进行安装：空间的波动和排出的空气不能够引起生物安全柜在运作时超出其控制参数，生物安全柜放在远离门、开放的窗户、走动比较频繁的实验室区域以及其它具潜在破坏性的设备处，以维持生物安全柜的气流参数，实验室内要配备高压灭菌器，并定期检查和验证。

10．生物安全柜的高效滤器每半年至少检测一次，根据检测技术指标及时进行更换相关的中高效过滤器，更换过滤器前必须彻底消毒，确保生物安全，更换过滤器后，必须经专业人员重新调试BSL-3实验室的压力，并检测合格后方可使用。

11．BSL-3 实验室的紫外灯使用满500小时必须进行消毒效能测试，以后每100小时测试一次；发现不合格者立即更换，压力蒸汽灭菌器应进行灭菌效能监测，确保始终处于良好状态。

12．所有感染性操作过程，必须在生物安全柜或其它物理防护装置里或穿戴个人防护服进行。

13．安全柜里排出的空气通过整座建筑排放系统释放到外环境中，不能干扰气流平衡或者建筑物的排风系统（如在安全柜排风与排风管道之间的空气间隙）。

14．实验室必须配备防护性实验服如前面密合或全套式实验袍、可擦洗式实验服或全封闭式实验服、乳胶手套、防护装置（如呼吸机，面罩等）和物理防护装置（如安全离心杯或封闭式转子）防护性实验服不能在实验室外穿戴。

15．在实验室中，可以使用一种方法能更好的对所有实验废物进行净化处理，即高压灭菌、化学消毒、焚化或其它允许的净化方法。

16．对设备进行消毒时，选择方法要慎重考虑。若废品需要转移出实验室时，必需密封，不能传播到公共走廊里。

17．配备一种管道排气通风系统，此系统产生定向气流。气流是从干净区域流向污染区域，在释放到实验室之前须经高效过滤器（HEPA）过滤排出。

18．实验室排出的废气经HEPA过滤后排出，不能循环流向楼里的任何区域，必需排到实验室外面，以便使其消散并远离拥挤的建筑物及进风口。

19．HEPA系统至少一年检查一次，若排出的气体远离工作区域和进风口，那么废气可排出室外。

20．三级生物安全实验室设备的设计及操作程序须制作成文件，通过使用经验对设备程序进行修改，每年重新确认。

21．实验室内照明光线适当，避免反光、强光、不眩目，无干扰的倒影，在出入口处要有防虫和防鼠规划。

22．实验室内有高压灭菌器，所在的建筑物内还应有高压灭菌器，有包括火、电等突发事件的处理安全系统，以及紧急喷淋设施和洗眼设施，装备容易到达的急救区或急救室。

23．有可靠和充分的电力供应及紧急照明，有备用的发电机以供应必要的设备，如：培养箱、生物安全柜、冰箱等以及动物笼的通风。

24．工作区外要有供饮食及休息的房间，有存放非实验室衣物及个人物品的设施。